اثر N-استیل-سیستئین بر روند پیری سلول های بنیادی لیمبال کشت شده بر روی پرده آمینوتیک انسانی

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی سبزوار، سبزوار، ایران

2 کارشناسی ارشد بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران

3 گروه بیوشیمی بالینی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران

10.30468/beyhagh.2026.1855

چکیده

مقدمه
در بیماری نقص سلول های بنیادی لیمبال، سلول های بنیادی لیمبال (LSCs) قادر به جایگزین کردن سلول های اپی تلیال از دست رفته نمی باشند. این امر موجب کاهش دید چشم و نابینایی می شود. در سال های اخیر استفاده از LSCs کشت داده شده برای پیوند مورد توجه قرار گرفته است اما پتانسیل تکثیری آن ها طی کشت به علت پیری ناشی از استرس اکسیداتیو کاهش می یابد. بدین منظور اثر آنتی اکسیدانی N-استیل-سیستئین بر روند پیری LSCs کشت شده مورد سنجش قرار گرفت.
روش کار
LSCs در سه گروه، گروه آزمایش تحت تیمار با N-استیل-سیستئین، گروه کنترل مثبت تحت تیمار با هیدورژن پراکسید و گروه بدون تیمار به عنوان کنترل، بر روی پرده آمینوتیک کشت داده شدند. روند حفظ و تکثیر LSCs طی کشت با رنگ‌آمیزی‌ هماتوکسیلین-‌ائوزین‌ و بررسی بیان مارکر اختصاصی ΔNP63α با روش ایمونوفلورسنت مورد‌ بررسی ‌قرار ‌گرفت. اثر آنتی اکسیدانی N-استیل-سیستئین در فرایند پیری سلول ها با سنجش فعالیت آنزیم بتاگالاکتوزیداز اندازه گیری شد.
نتایج
حضور سلولی و تکثیر LSCs طی کشت به ترتیب با رنگ آمیزی هماتوکسیلین-‌ائوزین‌ و ایمونوفلورسنت تاییدگردید. سلول های تیمار شده با N-استیل-سیستئین در تیمار کوتاه مدت و تیمار بلند مدت به طور معنی داری میزان کمتری از آنزیم بتاگلاکتوزیداز را نشان دادند که تاییدی بر نقش موثر N-استیل-سیستئین در تاخیر پیری سلولی می باشد.
نتیجه گیری
تیمار LSCs طی روند کشت با N-استیل-سیستئین می تواند در به تأخیر انداختن پیری آن ها در شرایط کشت تأثیرگذار باشد که این امر در بازسازی قرینه حائز اهمیت می باشد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

The effect of N-acetyl-cysteine on limbal stem cell senescence cultivated on the human amniotic membrane

نویسندگان [English]

  • Elaheh Emadi 1
  • Nadia Boroumand 2
  • Daryoush Hamidi Alamdari 3
1 Cellular and Molecular Research Center, Sabzevar University of Medical Sciences, Sabzevar, Iran.
2 Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
3 Department of Clinical Biochemistry, Faculty of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran
چکیده [English]

Introduction:
In limbal stem cell deficiency disease, limbal stem cells (LSCs) are unable to replace lost epithelial cells. This causes reduced eyesight and blindness. In recent years, the use of cultured LSCs for transplantation has been considered, but their proliferative potency declines during culture due to a premature-stress-induced senescence. For this purpose, the antioxidant effect of N-acetyl-cysteine on the aging process of cultured LSCs was surveyed.
Methods:
LSCs were cultivated on the amniotic membrane in three groups: the test group treated with N-acetyl-cysteine, the positive control group treated with H2O2, and the untreated group as a control. The presence and proliferation of LSCs during culture were assessed by hematoxylin-eosin staining and the expression of ΔNP63α specific marker by immunofluorescent assay. The effect of N-acetyl-cysteine on the senescence process of expanded LSCs was evaluated by measuring beta-galactosidase activity.
Results:
The presence of cells and the proliferation of LSCs during culture were confirmed by hematoxylin-eosin and immunofluorescent staining, respectively. Cells treated with N-acetyl-cysteine in short-term treatment and long-term treatment significantly presented a lower level of beta-galactosidase, which confirms the effective role of N-acetyl-cysteine in delaying the senescence of cultured LSCs.
Conclusion:
Treating LSCs with N-acetyl-cysteine during the culture process could be effective in delaying the senescence of LSCs, which could be valuable for long-term cornea restoration.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Limbal stem cells
  • Senescence
  • Oxidative stress
  • N-acetyl-cysteine